Эндонуклеазы рестрикции FastDigest — быстрый гидролиз в универсальном буфере. Обзор

04.02.2022

Эндонуклеазы рестрикции FastDigest — это 176 ферментов полностью активных в одном универсальном буфере FastDigest и FastDigest Green, позволяющих проводить гидролиз за 5-15 минут.

Буферы FastDigest Green и FastDigest являются уникальными буферными растворами для гидролиза, обеспечивающие полную активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest. Эта система позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера. Обычные эндонуклеазы рестрикции могут иметь неспецифическую («звездную») активность из-за продолжительного времени инкубации, высокой концентрации фермента и (или) глицерина, высоких значений pH или низкой ионной силы. Ферменты FastDigest позволяют избежать этих недостатков и обеспечить проведение однократных или многократных гидролизов за 5 минут без сокращения специфичности.

Буфер FastDigest Green дает возможность прямого нанесения реакционной смеси непосредственно на гель, он содержит реагент плотности и два трекинговых красителя для отслеживания.

Ферменты, участвующие в модификации молекул ДНК/РНК, такие как лигазы, фосфатазы, киназы и ДНК-полимеразы, полностью активны в буферных растворах FastDigest и FastDigest Green. Поэтому, на последующих этапах, ферменты можно сразу добавлять в реакционную смесь FastDigest. Нет необходимости в замене буфера или проведении очистки реакционной смеси.

Когда необходимо варьировать условия реакции гидролиза ДНК/РНК, то в этом случае можно использовать обычные эндонуклеазы рестрикции имеющие широкий выбор реакционных буферов, разные оптимальные температуры гидролиза и инактивации, и различную чувствительность к метилированию.

Рис.1. Буфер FastDigest Green

Рис.2. Гидролиз плазмидной ДНК эндонуклеазами рестрикции FastDigest и обычными

Однократный, двукратный и трехкратный гидролиз плазмидной ДНК в буферном растворе FastDigest Green за 5 минут • Дорожка М — маркер длины GeneRuler Express, Thermo FS • Дорожка 1 — контрольный материал, нерасщепленная плазмидная ДНК • Дорожка 2— FastDigest EcoRI • Дорожка 3 — FastDigest EcoRI и FastDigest KpnI • Дорожка 4 — FastDigest EcoRI, FastDigest KpnI и FastDigest SmaI

Рис.3. Однократный, двукратный и трехкратный гидролиз плазмидной ДНК в буферном растворе FastDigest Green за 5 минут

Рис 1. Буфер FastDigest Green.

Рис.2. Гидролиз плазмидной ДНК эндонуклеазами
рестрикции FastDigest и обычными

Рис.3. Однократный, двукратный и трехкратный гидролиз плазмидной ДНК в буферном растворе

Реакционная смесь, содержащая буфер FastDigest Green Buffer:

Дорожка 1 — нанесена на гель, до электрофореза.
Дорожка 2 — разделена, после электрофореза.

Дорожки:

M — Маркер длин ДНК GeneRuler 1 kb Plus.
C — необработанная плазмидная ДНК.
1 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 5 мин. FastDigest XhoI.
2 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 5 мин. FastDigest ApaI.
3 — двойной гидролиз плазмидной ДНК в течении 5 мин. FastDigest XhoI and FastDigest ApaI.
4 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 1 часа ApaI.
5 — гидролиз плазмидной ДНК в течении 1 часа XhoI.
6 — двойной гидролиз плазмидной ДНК в 1-кратном буфере Tango с 4-кратным избытком ApaI в течение 1 часа, и затем в 2-кратном буфере Tango с XhoI в течение еще 1 часа.

Дорожка М — маркер длины GeneRuler Express, Thermo FS.
Дорожка 1 — контрольный материал, нерасщепленная плазмидная ДНК.
Дорожка 2— FastDigest EcoRI.
Дорожка 3 — FastDigest EcoRI и FastDigest KpnI.
Дорожка 4 — FastDigest EcoRI, FastDigest KpnI и FastDigest SmaI.

Модель эндонуклеазы рестрикции Bgl I

Модель эндонуклеазы рестрикции EcoRV

Агарозный гель-электрофорез с продуктами гидролиза ДНК эндонуклеазами рестрикции

Информация для заказа:

Пока нет данных. Перейти в каталог

Развернуть все Названия полностью

Thermo FS

Буфер FastDigest для ускоренного гидролиза ДНК эндонуклеазами рестрикции FastDigest, 10x

B64

5х1 мл

хранение -30...-5°C

6 866, руб.

73,= USD

Универсальный буфер FastDigest является уникальным буферным раствором для гидролиза, который обеспечивает 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции для ускоренного гидролиза ДНК FastDigest.

Буфер позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз ДНК с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как лигазы, фосфотазы, киназы и мезофильные ДНК-полимеразы также имеют 100% активность в буфере FastDigest. Таким образом, ферменты, используемые в последующих применениях, могут быть непосредственно добавлены в реакционную смесь.

Преимущества универсального буфера FastDigest:

обеспечивает быстрое однократное, двойное или многократное расщепление ДНК в течение 5-15 минут;
100% активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest;
100% активность ДНК/РНК модифицирующих ферментов;
нет необходимости в промежуточных стадиях очистки ДНК;
исключает стадии последовательного гидролиза и замену буфера.

Концентрация	10x
Примечание	Хранение при 4 °C не более 6 месяцев.
Условия хранения	-20°С

Примечание: список всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest, активность ферментов, время инкубации и инактивации при нагревании см. в таблице «Реакционные условия для эндонуклеаз рестрикции FastDigest, Thermo FS, таблица, 2021 г.».

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

Thermo FS

Буфер FastDigest Green для ускоренного гидролиза ДНК эндонуклеазами рестриции FastDigest, с буфером для нанесения, 10x

B72

5х1 мл

5 929, руб.

63,= USD

Универсальный буфер FastDigest Green является уникальным буферным раствором для гидролиза, который обеспечивает 100% активность всех эндонуклеаз рестрикции для ускоренного гидролиза ДНК FastDigest.

Буфер позволяет выполнять двукратный и многократный гидролиз ДНК с любой комбинацией ферментов. Нет необходимости в последовательном гидролизе разными эндонуклеазами рестрикции или смене буфера.

ДНК/РНК модифицирующие ферменты, такие как лигазы, фосфотазы, киназы и мезофильные ДНК-полимеразы также имеют 100% активность в буфере FastDigest Green. Таким образом, ферменты, используемые в последующих применениях, могут быть непосредственно добавлены в реакционную смесь.

FastDigest Green содержит утяжеляющий раствор и трекинговые красители для прямого нанесения реакционной смеси на гель.

Для применений, требующих анализа продукта с помощью флуоресцентного возбуждения (например, измерения концентрации в УФ-свете), рекомендуется бесцветный FastDigest буфер.

Преимущества универсального буфера FastDigest Green

Обеспечивает быстрое однократное, двойное или многократное расщепление ДНК в течение 5-15 минут;
100% активность всех эндонуклеаз рестрикции FastDigest;
100% активность ДНК/РНК модифицирующих ферментов;
нет необходимости в промежуточных стадиях очистки ДНК;
исключает стадии последовательного гидролиза и замену буфера;
прямое нанесение реакционной смеси на гель.

Концентрация	10x
Примечание	Хранение при 4 °C не более 6 месяцев.
Условия хранения	-20 °С

Таблица «Эндонуклеазы рестрикции, Thermo FS»

См. также:

Ниже вы можете задать вопрос или оставить запрос в свободной форме

Укажите артикул, наименование/фасовку и производителя той продукции, которая вам необходима:

Раскрыть анкету для отправки запроса

Вход в личный кабинет

Оформление заказа без регистрации

ФИО: * Поле обязательно для заполнения

Юридическое лицо

Частное лицо

Выберите вариант

Название организации: * Введите название организации

ИНН: Введите ИНН организации

Телефон: * Неверный формат телефона

E-mail: * Неверный формат электронной почты

Адрес доставки:

Предпочтительный филиал для обращения

Я согласен на обработку персональных данных, а также с публичной офертой и политикой конфиденциальности

Подписаться на рассылку новостей компании

Поле обязательно для заполнения

Для продолжения регистрации введите ИНН

Восстановление пароля

Ссылка для восстановления пароля будет отправлена на Ваш адрес электронной почты

Регистрация пользователя

Заполните, пожалуйста, форму регистрации
Все поля со звездочкой (*) обязательны для заполнения

Фамилия: * Поле обязательно для заполнения

Имя: * Поле обязательно для заполнения

Отчество:

Предпочтительный филиал для обращения

Филиал: * Поле обязательно для заполнения

Адрес доставки:

Телефон: * Неверный формат телефона

E-mail: * Неверный формат электронной почты

Я согласен на обработку персональных данных, а также с публичной офертой и политикой конфиденциальности Поле обязательно к заполнению

Подписаться на рассылку новостей компании

Поле обязательно для заполнения

Техподдержка

Отменить

Техподдержка пользователей

Для более быстрого оформления запроса выберите тему обращения

Фамилия, Имя: * Поле обязательно для заполнения

Телефон: * Неверный формат телефона

E-mail: * Неверный формат электронной почты

Сообщение: *

Я согласен на обработку персональных данных, а также с публичной офертой и политикой конфиденциальности

Поле обязательно для заполнения

Отменить

Или позвоните по телефону: +7 (495) 745 - 05 - 08

Отмена регистрации

Вы уверены, что хотите отменить создание учетной записи и удалить все данные?
Данное действие необратимо.

Да, удалить

Нет, оставить

Зарегистрируйтесь на dia-m.ru,
чтобы сделать работу на сайте еще удобнее!

С помощью личного кабинета Вы сможете:

моментально получать счета на оформленные заказы;
отслеживать статусы выполнения заказа по оплате, отгрузке, наличию товаров на складе;
вести историю заказов, повторять заказы полностью или частично;
выбирать персонального менеджера;
формировать списки избранного среди товаров, справочных материалов и видео;
делать заказ со страницы избранных товаров;
экономить время при заполнении форм заказа по каталогам и регистрации на мероприятия.

Зарегистрироваться

Регистрация на сайте компании Диаэм доступна только для юридических лиц, для физических лиц сделать заказ и узнать его статус можно без регистрации или обратившись в компанию по телефону +7 495-745-0508 или электронной почте info@dia-m.ru

Оформить заказ без регистрации

Файлы cookie

Для повышения удобства работы с сайтом на нем используются файлы cookie. В cookie содержатся данные о Ваших прошлых посещениях сайта. Если Вы не хотите, чтобы эти данные обрабатывались, отключите cookie в настройках браузера.