Наборы для определения концентрации белка

Набор представляет собой готовое решение для определения уровня окисления жирных кислот (ЖК) в живых клетках с помощью обычного планшетного спектрофлуориметра. Данная позиция включает в себя 2 набора: набор для анализа уровня окисления ЖК (ab217602), а также набор для определения внеклеточного потребления кислорода (ab197243).

В наборе используется 18С мононенасыщенная олеиновая кислота в качестве субстрата.

Также набор включает модуляторы окисления ЖК: необратимый ингибитор карнитинацилтрансферазы-1 этомоксир и разобщитель окислительного фосфорилирования FCCP. Этомоксир, являясь ингибитором карнитинацилтрансферазы-1, предотвращает перенос ацильных групп в митохондрии и тем самым снижает количество восстановительных эквивалентов, поступающий в электронтранспортную цепь (ЭТЦ) и уровень восстановления кислорода. Оставшаяся часть активности ЭТЦ реализуется за счет окисления короткоцепочечных ЖК. Обработка FCCP индуцирует максимальную активность ЭТЦ за счет рассеивания энергии трансмембранного протонного градиента. В то же время, возрастающая потребность в восстановленных эквивалентах приводит к сопутствующей активации окисления ЖК. В условиях недоступности экзогенных длинноцепочечных ЖК или ингибирования их транспорта в митохондрии, скорость окисления ЖК будет ограничена.

Характеристики

• Метод детекции — флуоресценция;
• образец — адгезивные клетки, клеточная суспензия, очищенные митохондрии;
• температура хранения, °С — +4 – -20, согласно инструкции.

Набор для определения активности пируватдегидрогеназы (ПДГ) (ab109902) может использоваться для определения активности ПДГ в образцах тканей человека, быка, мыши или крысы. Метод основан на иммунологической иммобилизации ПДГ на внутренней поверхности лунок микропланшета, после чего активность фермента определяется по эффективности восстановления НАД+ до НАДН при комнатной температуре сопряженно с восстановлением красителя, в результате чего происходит образование окрашенного продукта с максимумом поглощения при 450 нм.

Набор включает буферный раствор, детергент, реакционную смесь и 96-луночный планшет с иммобилизованными моноклональными антителами к ПДГ.

Набор предназначен для работы с экстрактами цельных тканей; минимальный вес образца — не менее 20-100 мкг. При анализе экстрактов клеточных культур, минимальное количество образца должно составлять не менее 1 мг, поскольку экстракты клеточных культур характеризуются низким содержанием фермента и митохондрий.

Характеристики

• Метод детекции — колориметрический;
• образец — экстракт клеточной культуры, ткани, очищенные митохондрии;
• время анализа, ч — 3,5;
• видовая специфичность — человек, мышь, крыса, корова;
• температура хранения, °С — +4 – -20, согласно инструкции.

Раствор трипанового синего 0,4% используется для оценки жизнеспособности клеток. Принцип использования красителя основан на неспособности жизнеспособных клеток воспринимать непроницаемые красители и способности мертвых клеток воспринимать и быть проницаемыми для красителя. Таким образом мертвые клетки окрашиваются в синий цвет и могут быть легко дифференцируемы от живых клеток, которые остаются неокрашенными. Реагент поставляется в виде готового к применению раствора.

Характеристики набора AbiProt

• Метод детекции — количественный, спектрофотометрический;
• чувствительность набора, мкг/мл — до 5;
• линейность анализа — для BCA от 20 до 2000 мкг/мл.

Состав набора: раствор бицинхониновой кислоты (БХК), кристаллогидрат сульфата меди.

Реагенты стабильны при комнатной температуре. Срок годности 12 месяцев.