Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Набор позволяет быстро и просто выделить плазмидную ДНК без эндотоксинов с помощью улучшенной анионообменной мембраны. Всего за 90 минут можно выделить до 1,5 мг высококачественной плазмидной ДНК, которая подходит для передовых применений трансфекции, таких как трансфекция чувствительных клеточных линий или геномная инженерия.

Преимущества набора PureLink Expi Expi Endotoxin-Free Maxi Plasmid Purification Kit:

• быстрая процедура выделения (90 минут);
• выделение плазмидной ДНК из 100-200 мл ночной бактериальной культуры с выходом до 1,5 мкг ДНК;
• выделенные плазмиды не содержат эндотоксинов (концентрация эндотоксинов <0,1 EU/мкг) и идеально подходят для чувствительных приложений;
• высокая чистота плазмидной ДНК — сверхнизкие уровни загрязнения белками, РНК, геномной ДНК;
• полученная ДНК пригодна для использования с экспрессионными системами ExpiCHO и Expi293;
• содержит компоненты, не содержащие эндотоксинов: буфер для элюирования, вода и пробирки для хранения плазмид.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• трансфекция клеток млекопитающих (включая чувствительные клеточные линии);
• in vivo трансфекция;
• секвенирование ДНК;
• in vitro транскрипция.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор обеспечивает простой, надежный и быстрый метод выделения высококачественной тотальной РНК из образцов тканей, зафиксированных в формалине и залитых парафином (FFPE), для ретроспективных базовых и клинических биологических исследований экспрессии генов без использования токсичных органических растворителей для депарафинизации, таких как ксилол.

Преимущества набора PureLink FFPE RNA Isolation Kit:

• быстрая процедура выделения (30 минут);
• выход тотальной РНК превышает 1 мкг из 3-8 парафиновых срезов (10 мкм);
• обеспечивает более высокий выход и чистоту РНК по сравнению с другими коммерчески доступными наборами, позволяя получать продукты ОТ-ПЦР длиной более 1 т.п.н.;
• минимальное загрязнение геномной ДНК.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• обратная транскрипция;
• ПЦР в реальном времени;
• нозерн-блоттинг;
• микрочиповый анализ (microarray).

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор позволяет эффективно выделить общую ДНК примерно за 40 минут из различных образцов растений, таких как шпинат, помидоры, соя, пшеница, арабидопсис, а также из грибов. Масса образца составляет всего 100 мг.

Преимущества набора PureLink Genomic Plant DNA Purification Kit:

• быстрая процедура выделения (40 минут);
• выделенная ДНК имеет размер 20-50 тыс. п.н.;
• выход ДНК варьирует в зависимости от образца, и составляет (из 100 мг):
• кукуруза — 4,4-6,6 мкг;
• соя — 0,3-2 мкг;
• подсолнечник — 1,6-4 мкг;
• Arabidopsis thaliana — 1,8-3,1 мкг;
• грибы — 1,1-1,4 мкг;
• эффективность выделения ДНК составляет более 80%.
• выделенная ДНК имеет A260/280 >1,8.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• саузерн-блоттинг;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции;
• секвенирование.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор предназначен для выделения плазмидной ДНК высочайшей чистоты из 25-100 мл ночной бактериальной культуры. Набор содержит фильтрующие колонки HiPure, которые позволяют проводить фильтрацию для осветления бактериального лизата и очистку плазмидной ДНК анионообменной смолой. Чистота препаратов полученной плазмидной ДНК эквивалентна полученным двукратной очисткой с использованием градиента плотности хлорида цезия (самый эффективный метод очистки ДНК). Набор позволяет выделить высококачественную ДНК менее чем за два часа для трансфекции и других применений без необходимости дополнительных стадий для удаления загрязняющих веществ, таких как РНК, белки, эндотоксины. Кроме того, отсутствие в протоколе фенола, хлороформа, бромида этидия и хлорида цезия сводит к минимуму воздействие опасных материалов и их утилизацию.

Преимущества набора PureLink HiPure Plasmid Filter Midiprep Kit:

• быстрая процедура выделения (90-120 минут);
• простой протокол — осветление бактериального лизата без центрифугирования;
• выделение плазмидной ДНК с выходом 100-350 мкг ДНК из 15-25 мл (высокопийные плазмиды) или 25-100 мл (низкокопийные плазмиды) ночной бактериальной культуры;
• выделенные плазмиды не содержат эндотоксинов (концентрация эндотоксинов <0,1 EU/мкг) и A260/280 >1,8, что делает его идеальным для трансфекции клеток млекопитающих. Чистота ДНК соответствует препаратам, полученным двукратной очисткой в градиенте плотности хлористого цезия;
• в наборе используется новая запатентованная анионообменная смола, позволяющую выделять большие количества плазмидной ДНК, пригодной для трансфекции. Данная смола характеризуется большой емкостью, высокой линейной скоростью потока, высоким разрешением и эффективным удалением эндотоксинов.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• трансфекция;
• ПЦР
• секвенирование ДНК;
• in vitro транскрипция;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор предназначен для выделения плазмидной ДНК, пригодной для трансфекции из E. coli. Выход плазмидной ДНК из 100-200 мл бактериальной культуры составляет 500-850 мкг. Чистота полученной ДНК сравнима с ДНК, очищенной при двух проходах через градиент хлорида цезия.

Преимущества набора PureLink HiPure Plasmid Maxiprep Kit:

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор предназначен для выделения плазмидной ДНК, пригодной для трансфекции, из E coli. Выход плазмидной ДНК из 15-25 мл бактериальной культуры составляет 100-350 мкг. Чистота полученной ДНК сравнима с ДНК, двукратно очищенной с использованием градиента плотности хлорида цезия.

Преимущества набора PureLink HiPure Plasmid Midiprep Kit:

• быстрая процедура выделения (менее 120 минут);
• выделение плазмидной ДНК с выходом 100-350 мкг ДНК из 15-25 мл (высокопийные плазмиды) или 25-100 мл (низкокопийные плазмиды) ночной бактериальной культуры;
• выделенные плазмиды не содержат эндотоксинов (концентрация эндотоксинов <0,1 EU/мкг) и A260/280 >1,8, что делает их идеальными для трансфекции клеток млекопитающих. Чистота препаратов плазмидной ДНК сравнима с двукратной очисткой через градиент хлорида цезия;
• в наборе используется новая запатентованная анионообменная смола, позволяющую выделять большие количества плазмидной ДНК, пригодной для трансфекции. Смола характеризуется большой емкостью, высокой линейной скоростью потока, высоким разрешением и эффективным удалением эндотоксинов;
• возможна очистка любого типа и размера плазмидной ДНК, включая BAC, бакмиды и ssM13.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• трансфекция клеток млекопитающих;
• трансформация бактериальных клеток;
• ПЦР;
• секвенирование ДНК;
• in vitro транскрипция;
  
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор предназначен для выделения плазмидной ДНК, пригодной для трансфекции, из E. coli. Выход плазмидной ДНК из 1-3 мл бактериальной культуры составляет до 30 мкг. Чистота полученной ДНК сравнима с ДНК, двукратно очищенной с использованием градиента плотности хлорида цезия.

Преимущества набора PureLink HiPure Plasmid Maxiprep Kit:

• быстрая процедура выделения (менее 60 минут);
• выделение плазмидной ДНК с выходом до 30 мкг ДНК из 1-3 мл (высокопийные плазмиды) или 10-15 мл (низкокопийные плазмиды) ночной бактериальной культуры;
• выделенные плазмиды не содержат эндотоксинов (концентрация эндотоксинов <0,1 EU/мкг) и A260/280 >1,8, что делает его идеальным для трансфекции клеток млекопитающих. Чистота препаратов плазмидной ДНК сравнима с двукратной очисткой через градиент хлорида цезия;
• в наборе используется новая запатентованная анионообменная смола, позволяющую выделять большие количества плазмидной ДНК, пригодной для трансфекции. Смола характеризуется большой емкостью, высокой линейной скоростью потока, высоким разрешением и эффективным удалением эндотоксинов;
• возможна очистка любого типа и размера плазмидной ДНК, включая BAC, бакмиды и ssM13.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• трансфекция клеток млекопитающих;
• трансформация бактериальных клеток;
• ПЦР;
• секвенирование ДНК;
• in vitro транскрипция;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор предназначен для выделения микроРНК. Колонки PureLink обеспечивают простой, надежный и быстрый метод выделения высококачественной общей микроРНК (miRNA) из широкого спектра объектов без использования опасных реагентов, таких как фенол. Набор обеспечивает быстрый и удобный метод очистки малых молекул РНК из клеток животных, растений, бактерий, дрожжей.

Преимущества набора PureLink miRNA Isolation Kit:

• быстрая процедура выделения (менее 15 минут);
• набор специально разработан для очистки небольших молекул РНК, включая микроРНК (miRNAs) и малые интерферирующие РНК (siRNAs);
• риск загрязнения крупными молекулами РНК (таких как 28S рРНК, 18S рРНК и мРНК) и геномной ДНК сведен к минимуму;
• более высокая емкость спиновой колонки PureLink по сравнению с другими коммерчески доступными системами для выделения плазмидной ДНК;
• выделение микроРНК с выходом:
• клетки HeLa (1 × 10⁶) — до 1,29 мкг;
• мышиная печень (5 мг) — до 0,71 мкг;
• крысиная селезенка (5 мг) — до 1,39 мкг;
• дрожжи (S. Cerevisae, 1 × 10⁶) — до 6,21 мкг;
• бактерии (E. coli, 2 × 10⁶) — до 0,55 мкг.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• секвенирование РНК;
• нозерн-блоттинг;
• микрочиповый анализ (microarray).

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор идеально подходит для очистки и концентрации ДНК, полученных в ходе низкоэффективных реакций ПЦР или реакций гидролиза рестриктазами. Очищенные фрагменты ДНК и ампликоны пригодны для использования в последующих приложениях, таких как секвенирование ДНК, гидролиз рестриктазами, клонирование, ПЦР.

Преимущества набора PureLink PCR Micro Kit:

• быстрая процедура выделения (10 минут);
• эффективно работает с фрагментами ДНК от 100 п.н. до 12 000 п.н.;
• эффективность очистки от праймеров, нуклеотидов, ферментов и солей превышает 98,5%;
• уникальная конструкция колонки позволяет выделять до 95% фрагментов ДНК из элювиата объемом всего 5 мкл.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• секвенирование ДНК;
• нозерн-блоттинг;
• молекулярное клонирование;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор обеспечивает более удобный, быстрый и высокопроизводительный процесс очистки по сравнению с аналогами других компаний. После ПЦР-амплификации очистка ПЦР-ампликонов требуется для многих последующих применений (включая гидролиз эндонуклеазами рестрикции, лигирование, секвенирование и мечение ДНК) для того, чтобы предотвратить перенос ферментов (полимеразы, эндонуклеазы рестрикции) и компонентов реакции (dNTPs, праймеры, буферы, соли), которые могут негативно влиять на последующие манипуляции с ДНК. Набор применим только для выделения и очистки линейных (не кольцевых) фрагментов ДНК.

Преимущества набора PureLink PCR Purification Kit:

• быстрая процедура выделения (10 минут);
• высокий выход целевого продукта — до 40 мкг ДНК;
• нет необходимости контролировать рН образца;
• позволяет опционно выделять фрагменты ДНК размером 300-600 п.н., или удалять фрагменты менее 300 п.н.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• секвенирование ДНК;
• молекулярное клонирование;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор позволяет выделять фрагменты ДНК из агарозного геля, а также проводить очистку ампликонов после реакции ПЦР. Выделение фрагментов ДНК размером 40 п.н. – 10 000 п.н. занимает около 20 минут. Очистка ампликонов (длиной более 100 п.н.) от других компонентов ПЦР (праймеры, dNTPs, ферменты, соли) происходит за 10 минут.

Преимущества набора PureLink Quick Gel Extraction and PCR Purification Combo Kit:

• быстрая процедура выделения ДНК из геля (20 минут) и очистки ампликонов (10 минут);
• высокий выход целевого продукта — до 40 мкг ДНК;
• эффективность выделения и очистки составляет более 85%;
• выделенная ДНК имеет A260/280 >1,8.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• секвенирование ДНК;
• молекулярное клонирование;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор позволяет быстро и эффективно очищать фрагменты ДНК из агарозных гелей TAE или TBE различного процентного содержания. ДНК может быть выделена и очищена из агарозных гелей с различной температурой плавления в течение 30 минут с помощью колонок PureLink на основе кремнеземной мембраны. Предусмотрены протоколы очистки с применением центрифугирования и вакуума. Данный набор применим только для выделения и очистки линейных (не кольцевых) фрагментов ДНК.

Преимущества набора PureLink Quick Gel Extraction Kit:

• быстрая процедура выделения ДНК из геля (30 минут);
• размеры выделенных фрагментов ДНК — от 40 п.н. до 10 000 п.н;
• высокий выход целевого продукта — до 15 мкг ДНК;
• эффективность выделения и очистки составляет до 95%;
• выделенная ДНК имеет A260/280 >1,8.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• секвенирование ДНК;
• молекулярное клонирование;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор обеспечивает быстрое выделение тотальной РНК из различных образцов (ткани, полученные при помощи лазерной захватывающей микродиссекции (LCM), аспирационный биоптат, клетки млекопитающих, дрожжи). В протоколе не применяется фенол/хлороформ, градиент хлористого цезия, осаждение с помощью хлористого лития или этанола.

Преимущества набора PureLink RNA Micro Scale Kit:

• очень быстрая процедура выделения РНК (15 минут);
• выход целевого продукта:
• клетки HeLa (5 × 10⁵) — 7,5 мкг;
• клетки HEK293 (5 × 10⁵) — 10 мкг;
• печень крысы (5 мг) — 17 мкг;
• мозг крысы (5 мг) — 2 мкг;
• селезенка крысы (5 мг) — 13,1 мкг;
• эффективность выделения РНК составляет более 85%;
• минимальное загрязнение геномной ДНК;

Выделенная РНК может использоваться для следующих приложений:

• ОТ-ПЦР;
• нозерн-блоттинг;
• создание библиотек кДНК;
• анализ с защитой от действия нуклеаз.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор обеспечивает быстрый и эффективный метод одновременного выделения вирусной РНК и ДНК из свежих или замороженных биологических жидкостей, не содержащих клеток (плазма, сыворотка спинномозговая жидкость) и из супернатантов клеточных культур.

Преимущества набора PureLink Viral RNA/DNA Mini Kit:

• быстрая процедура выделения (45 минут);
• позволяет получить элюаты нуклеиновых кислот малых объемов — 10-50 мкл;
• используется РНК-носитель (тРНК дрожжей), которая увеличивает выход и уменьшает деградацию нуклеиновых кислот;
• отсутствие загрязнения белками и нуклеазами.

Выделенные нуклеиновые кислоты могут использоваться для следующих приложений:

• ОТ-ПЦР;
• ПЦР в реальном времени;
• нозерн-блоттинг;
• микрочиповый анализ (microarray).

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре. РНК-носитель хранится при -20°С.

Набор для очистки РНК TRIzol Plus RNA Purification обеспечивает простой, надежный и быстрый метод выделения высококачественной общей РНК из широкого спектра образцов, включая клетки животных и растений, ткани, бактерии и дрожжи. Набор сочетает в себе лизирующий реагент TRIzol, а также картриджи с силикагелем PureLink RNA Mini для выделения сверхчистой общей РНК в течение часа, даже из сложных образцов, таких как волокнистые или жировые ткани. Набор обеспечивает эффективный лизис и даёт возможность получения РНК высокого качества за счёт ингибирования РНКаз.

Особенности набора TRIzol Plus RNA Purification:

• выделение из растений, дрожжей, тканей, бактерии, клеток;
• выход с одного выделения - 1000 мкг РНК;
• количество исходного материала - до 5·108 клеток или до 200 мг ткани.

Преимущества набора TRIzol Plus RNA Purification:

• сочетание технологии лизиса клеток на основе TRIzol и выделения РНК на основе спиновых колонок PureLink;
• удобные протоколы лизиса клеток и выделения РНК;
• является рекомендуемым методом очистки РНК в индустрии экспрессии генов.

Состав набора TRIzol Plus RNA Purification:

• реагент TRIzol (100 мл);
• лизирующий буфер (125 мл);
• промывочный буфер I (50 мл);
• промывочный буфер II (15 мл);
• вода свободная от РНКаз (15,5 мл);
• спин-картриджи с пробирками для сбора продукта (по 50 штук в каждой);
• пробирки для сбора продукта (по 50 штук в каждой).

Выделенная ДНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• анализа на микрочипах;
• ПЦР в реальном времени (qPCR);
• ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР);
• построения библиотек кДНК;
• модификации нуклеиновых кислот;
• футпринтинга; Нозерн-блоттинга.

Принцип работы набора TRIzol Plus RNA Purification:

Лизис образца с помощью TRIzol поддерживает целостность РНК, разрушая клетки и растворяя клеточные компоненты. TRIzol также обеспечивает немедленное и высокоэффективное ингибирование активности РНКаз во время гомогенизации образца. После лизиса в образце РНК связывается с мембраной на основе кремнезема в картриджах PureLink RNA Mini, промывается для удаления загрязнений, а затем элюируется водой свободной от РНКаз (также может использоваться Трис-буфер, рН 7,5).

Условия хранения и перевозки - комнатная температура.

Набор позволяет выделять геномную ДНК с высоким выходом и высокой чистотой из широкого спектра образцов животного происхождения (кровь, ткани, клетки, мазки) и из бактерий. Для каждого типа образца имеется отдельный оптимизированный протокол, описанный в инструкции.

Преимущества набора PureLink Genomic DNA Mini Kit:

• быстрая процедура выделения (30 минут);
• выделенная ДНК имеет размер 20-50 тыс. п.н;
• выход ДНК варьирует в зависимости от образца, но составляет не менее 4 мкг;
• эффективность выделения ДНК составляет более 80%;
• выделенная ДНК имеет A260/280 >1,7.

Выделенная ДНК может использоваться для следующих приложений:

• ПЦР;
• саузерн-блоттинг;
• гидролиз эндонуклеазами рестрикции;
• секвенирование.

Условия хранения и перевозки: при комнатной температуре.

Набор PureLink RNA Mini Kit предназначен для выделения суммарной РНК из широкого спектра биологических образцов — животных и растительных клеток и тканей, цельной крови, дрожжей и бактерий.

Преимущества набора:

• возможность выделения РНК одним набором из различных биологических материалов;
• минимальная контаминация геномной ДНК и возможность полного её удаления с помощью ДНКазной обработки;
• быстрый и простой протокол выделения;
• получение чистой РНК, пригодной для дальнейших манипуляций.

Выделение РНК происходит на спин-колонках; методика выделения заключается в гомогенизации и лизисе образцов в присутствии хаотропной соли, нанесении образца на спин-колонку, отмывке от загрязнений и элюции чистого препарата ДНК. Для эффективного лизиса сложных образцов можно использовать TRIzol.

Для получения РНК, не содержащей примеси ДНК, в качестве опции предлагается ДНКазаная обработка образца непосредственно на спин-колонке с помощью набора PureLink DNase Set (приобретается отдельно).

Выделенная РНК пригодна для следующих молекулярно-биологических манипуляций:

• ПЦР в реальном времени;
• количественная ПЦР в реальном времени;
• блоттинг РНК;
• амплификация РНК;
• получение библиотек кДНК (после поли(А)+ селекции).